Ergebnisse

Das Ziel war, Photorezeptor-Mutanten zu generieren, welche sich in der Zerfallskinetik des Lichtzustandes hinreichend unterscheiden. LOV-Domänen, welche vergleichsweise langsam in den Dunkelzustand relaxieren, wären unter regelmäßigen Lichtpulsen größtenteils im Lichtzustand, wohingegen LOV-Domänen, welche schneller relaxieren unter geeigneten Lichtpulsen größtenteils im Dunkelzustand vorlägen. Dies würde eine selektive Aktivierung von LOV-Domänen über Lichtpulse ermöglichen. Zu diesem Zweck wurden die Mutanten YF1-V28T, YF1-V28L, YF1-V28I und LF1-L36V erzeugt. Die Homologe dieser Mutationen waren in anderen LOV-Domänen bereits untersucht worden. Mutationen des zu V28 homologen Valins in AsLOV2 (V416) hatten einen starken Einfluss auf die Zerfallsgeschwindigkeit des Photoaddukts (Kawano, et al., 2013) und wurden daher in YF1 untersucht.